檢測(cè)業(yè)務(wù)
飛凡標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)(蘇州)有限公司
利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)過(guò)敏反應(yīng)
【評(píng)價(jià)原理】
過(guò)敏原/致敏因子誘導(dǎo)組織學(xué)上肥大細(xì)胞脫顆粒,釋放活性介質(zhì)如組胺、5-HT,前列腺素D、白三烯、血小板活化因子等,表現(xiàn)為平滑肌收縮,毛細(xì)血管擴(kuò)大和通透性增強(qiáng),腺體分泌物增多等,誘發(fā)多種過(guò)敏癥狀。 類(lèi)胰蛋白酶是肥大細(xì)胞內(nèi)預(yù)先合成的中性蛋白酶,是臨床上檢驗(yàn)人體是否過(guò)敏的重要指標(biāo)。斑馬魚(yú)產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)時(shí),亦誘導(dǎo)肥大細(xì)胞分泌類(lèi)胰蛋白酶。C48/80作為肥大細(xì)胞活化劑,可以誘導(dǎo)組織學(xué)上肥大細(xì)胞脫顆粒,釋放類(lèi)胰蛋白酶。
我們檢測(cè)過(guò)敏有兩種方法。1. 類(lèi)胰蛋白酶的含量:用酶標(biāo)儀檢測(cè)類(lèi)胰蛋白酶的含量。2. 肥大細(xì)胞數(shù)量:制作病理切片,經(jīng)過(guò)過(guò)碘酸雪夫染色,肥大細(xì)胞呈藍(lán)色,肥大細(xì)胞釋放的組胺和白三烯等物質(zhì)呈紅色。
【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成四組,分別是正常對(duì)照組和滴注致敏劑低、中、高劑量組。其中正常對(duì)照組未滴注C48/80,滴注致敏劑組均滴注C48/80低、中、高劑量(C48/80通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。
滴注C48/80一段時(shí)間后,利用酶標(biāo)儀檢測(cè)類(lèi)胰蛋白酶含量(吸光度值),同時(shí)制作病理切片進(jìn)行過(guò)碘酸雪夫染色。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚(yú)類(lèi)胰蛋白酶含量(吸光度值)
與正常對(duì)照組比較,*p < 0.05,***p < 0.001
可以看到,滴注中、高濃度致敏劑組類(lèi)胰蛋白酶含量與正常對(duì)照組比較明顯升高。
圖2. 斑馬魚(yú)體內(nèi)肥大細(xì)胞染色典型圖
箭頭指示為肥大細(xì)胞
從病理切片中也能看出來(lái),滴注致敏劑組斑馬魚(yú)的肥大細(xì)胞與正常對(duì)照組相比數(shù)量明顯上升。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),滴注致敏劑組斑馬魚(yú)類(lèi)胰蛋白酶含量和肥大細(xì)胞數(shù)量與正常對(duì)照組相比數(shù)量明顯上升。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了C48/80具有明顯的致敏作用。
飛凡檢測(cè)質(zhì)檢報(bào)告流程:
1、 提供產(chǎn)品資料2、 工程師根據(jù)您的產(chǎn)品推薦合適檢測(cè)項(xiàng)目,并給出報(bào)價(jià)
3、 確認(rèn)報(bào)價(jià)沒(méi)有問(wèn)題,然后把樣品送到我們實(shí)驗(yàn)室
4、 支付檢測(cè)費(fèi)用,安排檢測(cè)
5、檢測(cè)完成,出具檢測(cè)報(bào)告,郵寄給客戶
咨詢(xún)熱線:18018131362
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