遺傳毒性

瀏覽次數(shù)：1176|來源：飛凡檢測 | 2021-11-16 13:41:16

遺傳毒性 ISO 10993-3， GB/T 16886.3 OCED471， OECD473， OECD474， OECD476

Ames實(shí)驗(yàn)：中文名稱：鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變試驗(yàn).

實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮希?/span>

鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）的組氨酸營養(yǎng)缺陷型（his－）菌株，在含微量組氨酸的培養(yǎng)基中，除極少數(shù)自發(fā)回復(fù)突變的細(xì)胞外，一般只能分裂幾次，形成在顯微鏡下才能見到的微菌落。受誘變劑作用后，大量細(xì)胞發(fā)生回復(fù)突變，自行合成組氨酸，發(fā)育成肉眼可見的菌落。某些化學(xué)物質(zhì)需經(jīng)代謝活化才有致變作用，在測試系統(tǒng)中加入哺乳動物微粒體酶，可彌補(bǔ)體外試驗(yàn)缺乏代謝活化系統(tǒng)之不足。

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哺乳動物細(xì)胞體外基因突變試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮恚?/span>

TK基因的產(chǎn)物胸苷激酶在體內(nèi)催化從脫氧胸苷（TdR）生成胸苷酸（TMP）的反應(yīng)。在正常情況下，此反應(yīng)并非生命所必需，原因是體內(nèi)的TMP主要來自于脫氧尿嘧啶核苷酸（dUMP），即由胸苷酸合成酶催化的dUMP甲基化反應(yīng)生成TMP。但如在細(xì)胞培養(yǎng)物中加入胸苷類似物（如三氟胸苷，即TFT——trifluorothymidine），則TFT在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸，進(jìn)而摻入DNA，造成致死性突變，故細(xì)胞不能存活。若TK基因發(fā)生突變，導(dǎo)致胸苷激酶缺陷，則TFT不能磷酸化，亦不能摻入DNA，故細(xì)胞在含有TFT的培養(yǎng)基中能夠生長，即表現(xiàn)出對TFT的抗性。根據(jù)突變集落形成數(shù)，計算突變頻率，以判定受試物的致突變性。

哺乳動物細(xì)胞體外染色體畸變試驗(yàn)

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染色體畸變分為染色體結(jié)構(gòu)畸變和數(shù)目畸變，染色體結(jié)構(gòu)畸變又分為缺失、短片、互換等。

在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下，使培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞暴露于受試物中，用中期分裂相阻斷劑（如秋水仙素或秋水仙堿）處理，使細(xì)胞停止在中期分裂相，隨后收獲細(xì)胞，制片，染色，分析染色體畸變。

小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)

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微核是在細(xì)胞的有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時，仍然留在細(xì)胞質(zhì)中的染色單體或染色體的無著絲粒片段或環(huán)。它在末期以后，單獨(dú)形成一個或幾個規(guī)則的次核，被包含在細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)而形成，由于比核小得多，故稱微核。

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