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利用斑馬魚模型評價骨毒性
【評價原理】
藥物骨毒性的安全性研究與肝、腎、心臟毒性等一般毒性相比較為薄弱,尤其是兒科人群用藥的骨毒性安全問題,骨毒性非臨床安全性評價愈加受到重視。斑馬魚是一種與人類同源性較高的脊椎動物,和哺乳動物一樣,斑馬魚的骨骼是從3種胚胎干細胞系即神經(jīng)嵴、體節(jié)中胚層和側(cè)板發(fā)育而來的。
斑馬魚骨骼經(jīng)過特異性的熒光染色后,經(jīng)熒光顯微鏡采集到熒光強度能反映出骨密度和脊椎骨的數(shù)量,從而評價供試品骨毒性。
【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照和供試品組(供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用/注射供試品一段時間后,我們對斑馬魚整體做骨鈣染色,以脊椎骨熒光強度和脊椎骨數(shù)量評價供試品的骨毒性。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚骨密度表型圖
黃色虛線區(qū)域為計算用脊椎骨
可以看到,服用/注射供試品組斑馬魚脊椎骨熒光強度明顯減弱。
圖2. 斑馬魚脊椎骨數(shù)量表型圖
可以看到,服用/注射供試品組斑馬魚脊椎骨數(shù)量明顯減少。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用/注射供試品組的斑馬魚脊椎骨熒光強度明顯減弱、數(shù)量明顯減少,與正常對照組存在明顯的差別。
2.本實驗證實了該供試品對斑馬魚有骨毒性。
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